发布日期：2025/06/11

以下是生化实验中常用试剂的分类及用途总结，结合实验安全与操作要点，供实验参考：

 一、基础化学试剂  

  1. 酸碱类试剂  
    盐酸（HCl）、氢氧化钠（NaOH）    
      作用  ：调节溶液pH值，配制缓冲液。  
      应用  ：细胞裂解液、酶反应体系的pH调控。

 
    硫酸（H₂SO₄）、乙酸（CH₃COOH）    
      作用  ：强酸/弱酸，用于沉淀蛋白、调节酸性环境。  
      应用  ：蛋白质变性实验、DNA提取中的酸性条件设置。  

  2. 盐类试剂  
    氯化钠（NaCl）    
      作用  ：维持渗透压，促进蛋白溶解或沉淀。  
      应用  ：DNA提取中的盐溶液（如TE缓冲液含NaCl）、细胞培养液。  

    氯化钾（KCl）、氯化镁（MgCl₂）    
      作用  ：提供离子环境，激活酶（如Mg²⁺是DNA聚合酶的辅因子）。  
      应用  ：PCR反应体系、酶活性测定实验。

  3. 有机溶剂  
    乙醇（Ethanol）、异丙醇（Isopropanol）    
      作用  ：沉淀核酸、蛋白，固定细胞，消毒。  
      应用  ：DNA/RNA提取中的沉淀步骤、实验器材消毒。  

    丙酮（Acetone）、二甲亚砜（DMSO）    
      作用  ：溶解脂类、难溶性化合物（如DMSO溶解PCR引物）。  
      应用  ：脂质提取、细胞冻存液（DMSO作为冻存保护剂）。  

 二、生物大分子研究试剂  
  1. 核酸相关试剂  
    Tris HCl缓冲液    
      作用  ：维持核酸提取液的pH稳定（通常pH 7.5 8.5）。  
      应用  ：DNA/RNA提取试剂盒、质粒纯化。  

    乙二胺四乙酸（EDTA）    
      作用  ：螯合金属离子，抑制核酸酶活性。  
      应用  ：DNA保存液、细胞裂解液（如TE缓冲液含EDTA）。  

    十二烷基硫酸钠（SDS）    
      作用  ：强去污剂，裂解细胞并变性蛋白。  
      应用  ：DNA提取中的细胞裂解、SDS PAGE凝胶电泳（分离蛋白）。  

 

  2. 蛋白质相关试剂  
     Tris HCl缓冲液（蛋白专用，pH 6.8 8.8）    
      作用  ：维持蛋白溶液的pH，防止变性。  
      应用  ：蛋白提取、Western blot实验。  

    苯甲基磺酰氟（PMSF）    
      作用  ：丝氨酸蛋白酶抑制剂，防止蛋白降解。  
      应用  ：蛋白提取过程中保护目标蛋白。  

    考马斯亮蓝（Coomassie Brilliant Blue）    
      作用  ：与蛋白结合显色，用于蛋白定量（Bradford法）或电泳染色。  
      应用  ：蛋白浓度测定、SDS PAGE凝胶染色。  

 三、染色与检测试剂  
  1. 核酸染色剂  
    溴化乙锭（EB）    
      作用  ：插入DNA双链，紫外下显荧光，用于电泳检测核酸。  
      注意  ：强致癌物，现多被安全替代物（如SYBR Green、GoldView）取代。  

    甲基绿（Methyl Green）、派洛宁（Pyronin）    
      作用  ：分别染色DNA（绿色）和RNA（红色），用于细胞内核酸定位。  
      应用  ：组织切片或细胞涂片的核酸染色。  

  2. 蛋白染色剂  
    丽春红S（Ponceau S）    
      作用  ：可逆性染色蛋白，用于Western blot中转膜效率验证。  
      应用  ：膜上蛋白的快速可视化检测。  

    银染试剂（硝酸银、甲醛等）    
      作用  ：高灵敏度染色蛋白，用于电泳后微量蛋白检测。  
      应用  ：双向电泳（2 DE）后的蛋白图谱分析。  

  3. 细胞活性检测试剂  
    台盼蓝（Trypan Blue）    
      作用  ：死细胞染色（活细胞拒染），用于细胞计数和存活率评估。  
      应用  ：细胞培养中的 viability 检测。  

    MTT试剂（3 (4,5 二甲基噻唑 2) 2,5 二苯基四氮唑溴盐）    
      作用  ：检测细胞代谢活性，活细胞线粒体酶将MTT还原为紫色甲臜。  
      应用  ：细胞增殖或毒性实验（如药物筛选）。  

 四、缓冲液与溶液  
  1. 常用缓冲液  
    磷酸盐缓冲液（PBS，pH 7.2 7.4）    
      成分  ：NaCl、KCl、Na₂HPO₄、KH₂PO₄  
      作用  ：模拟生理渗透压，维持pH稳定，用于细胞洗涤、保存。  
      应用  ：细胞培养、免疫组化实验。  

    Tris 盐酸缓冲液（Tris HCl，pH 6.8 8.8）    
      作用  ：广泛用于核酸和蛋白实验的pH缓冲。  
      应用  ：DNA提取、SDS PAGE凝胶配制（分离胶pH 8.8，浓缩胶pH 6.8）。  

  2. 特殊用途溶液  
    TE缓冲液（Tris EDTA，pH 8.0）    
      作用  ：溶解并保存DNA，EDTA抑制核酸酶。  
      应用  ：质粒DNA、基因组DNA的长期储存。  

    TAE/TBE缓冲液（用于核酸电泳）    
      成分  ：Tris、乙酸/硼酸、EDTA  
      作用  ：提供电泳电场环境，EDTA抑制核酸酶。  
      应用  ：琼脂糖凝胶电泳分离DNA/RNA。  

 五、酶与辅酶类试剂  
    DNA聚合酶（如Taq酶、Pfu酶）    
      作用  ：催化DNA链合成，用于PCR扩增。  
      应用  ：基因克隆、突变检测。  

    限制性内切酶（如EcoRI、HindIII）    
      作用  ：识别并切割特定DNA序列，用于基因工程。  
      应用  ：质粒构建、DNA酶切分析。  

    辣根过氧化物酶（HRP）、碱性磷酸酶（AP）    
      作用  ：酶联免疫吸附实验（ELISA）或Western blot中的信号放大。  
      应用  ：抗原 抗体反应的显色检测（如DAB显色）。  

 六、安全与防护注意事项  
1.   有毒试剂  ：如EB、PMSF、DMSO需在通风橱操作，佩戴手套和护目镜。  
2.   易燃易爆试剂  ：乙醇、丙酮远离火源，密封保存。  
3.   强酸强碱  ：HCl、NaOH需小心操作，避免皮肤接触，用后及时盖紧瓶盖。  
4.   生物危害  ：涉及病毒、细菌的实验试剂需灭菌处理，按生物安全等级操作。